產品編號：M002

產品簡介

本公司生產的Lysis Buffer是一種適用于細胞、組織及細菌的總RNA抽提試劑。

包裝規格

有效期12個月。

注意事項

• 本產品僅限于科學研究使用。
• 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴護目鏡、一次性手套和口罩操作。
• 所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品，操作過程要小心，避免環境中RNA酶污染樣品。
• 需自備氯仿或RNA pure，異丙醇，DEPC水(貨號：M004)，75%乙醇(DEPC水配制)。

操作說明

1. 樣本處理：
2. 組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1mLLysis Buffer，充分勻漿。
3. 貼壁細胞：吸盡培養基，每10⁶細胞加1mL Lysis Buffer，吹打混勻。
4. 懸浮細胞：離心收集細胞，每10⁶動物、植物和酵母細胞或每10⁷細菌細胞加1mLLysis Buffer，吹打混勻。
5. 室溫放置5min，使核酸蛋白復合物完全分離。
6. 每1mL樣品中加2mL氯仿或RNA pure，蓋好管蓋，劇烈振蕩15s，室溫放置3min。
7. 4℃ 12000 rpm離心15min，小心吸取上層無色水相至新管中。
8. 按每毫升最初的Trizol加入5mL異丙醇，顛倒數次混勻，室溫沉淀10min。如果希望提取 microRNA 等 小 RNA，推薦-70℃沉淀過夜。
9. 4℃ 12000 rpm離心10min，管底可見RNA沉淀，棄上清。
10. 按每毫升最初的Trizol加入1ml 75%乙醇，顛倒混勻，4℃ 8000 rpm離心5min，棄上清。
11. 4℃ 5000 rpm離心15s，小心吸盡液體。
12. 開蓋室溫放置數分鐘，待RNA略干后，加入DEPC水溶解，-70ºC凍存。注意：切勿讓RNA過分干燥，否則將極難溶解，且測出的A260/280值會低于6。