自動化在線衍生-紫外檢測法

賽默飛Vanquish液相色譜的自動進樣器配合變色龍軟件（Chromeleon），可提供用戶自定義進樣程序（User-Defined Program, UDP），從而完全替代人工，實現(xiàn)定制化、自動化的在線氨基酸衍生操作，完美契合2020藥典增補9120氨基酸指導(dǎo)原則中“衍生化操作也可由具有自動衍生功能的進樣器完成”的需求。

Vanquish 液相色譜和自動進樣器

方法結(jié)合OPA和FMOC衍生試劑，Acclaim 120 C18色譜柱（PN: 059148）和Vanquish自動進樣器在線針內(nèi)衍生功能，可以輕松實現(xiàn)氨基酸的在線自動化衍生、分析。無需手動衍生，節(jié)省了試劑消耗和人力成本，同時在線衍生程序編輯智能、簡便，大幅提升了氨基酸檢測效率。

另外，指導(dǎo)原則方法三中提到一級和二級氨基酸衍生物“經(jīng)反相高效液相色譜分離后需用紫外光檢測器在338nm和262nm波長處分別檢測”。基于雙波長檢測要求，客戶通常會選擇二極管陣列檢測器，或單通道紫外檢測器結(jié)合波長切換等方法，而賽默飛Vanquish Core 紫外檢測器標(biāo)配雙檢測通道特點，無需波長切換即可實現(xiàn)兩個波長的同時檢測，結(jié)果優(yōu)于相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)高效液相色譜方法的檢測靈敏度。

非衍生-電霧式檢測法

賽默飛電霧式檢測器（Charged Aerosol Detector，CAD）作為通用型檢測領(lǐng)域的典型代表，憑借其在靈敏度、重現(xiàn)性以及響應(yīng)一致性等方面的顯著優(yōu)勢而備受用戶關(guān)注和青睞，成為國內(nèi)外各大藥企和科研院所在研發(fā)和質(zhì)量控制等應(yīng)用方面的一大利器。而基于大部分氨基酸紫外吸收較弱的特點，CAD又為氨基酸檢測，開辟了一條衍生方法以外的獨特檢測捷徑。

Vanquish 電霧式檢測器（CAD）

CAD檢測器結(jié)合賽默飛Hypercarb多孔石墨化碳色譜柱（PN:35005-154630）在極性化合物分析方面的獨特優(yōu)勢，可以實現(xiàn)無需衍生的氨基酸直接分析，大大簡化了前處理步驟，也完美規(guī)避了指導(dǎo)原則中提及的關(guān)于“二級氨基酸衍生重復(fù)性較差，OPA-氨基酸衍生物不穩(wěn)定”等實際問題。兩種方法在重現(xiàn)性和靈敏度方面的表現(xiàn)基本相當(dāng)。

總  結(jié)

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典（2020版第一增補本）[S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2023: 623.

[2] Pual H. Gamache等. 電霧式檢測在液相色譜及相關(guān)分離中的應(yīng)用[M].第1版. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2024.

[3] AN_20056_HPLC_藥物_全新Vanquish Core高效液相色譜系統(tǒng)用于氨基酸分析——在線衍生紫外檢測和非衍生電霧式檢測方法比較

[4] 陸明, 孫黛妮, 汪楊等. OPA-FMOC聯(lián)用柱前衍生化法測定復(fù)方氨基酸注射液中氨基酸的含量[J].藥物分析雜志, 2010, 30(12): 2323-2327.

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