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動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2015-03-30 00:00 338閱讀次數(shù)
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動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒
- 主要用途動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑是一種旨在通過(guò)機(jī)械或化學(xué)處理、差速和等密度離心方法,從動(dòng)物細(xì)胞中分離出活性完整而高度純化的高爾基細(xì)胞器組分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,純度可達(dá)99%。適合于各種動(dòng)物細(xì)胞,包括人體細(xì)胞等的高爾基體的制備。可以被用于受體循環(huán)、糖蛋白和脂蛋白合成,以及抗體釋放機(jī)制等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量高。技術(shù)背景高爾基體(Golgiapparatus或Golgibodies),又稱(chēng)為高爾基復(fù)合體(Golgicomplex),是一種細(xì)胞器,存在于大多數(shù)真核生物細(xì)胞中。高爾基體由扁平膜結(jié)合的高爾基堆(stacks),即小池(cisternae)組成,約有4至8層,分成3個(gè)功能區(qū):順面、中層、反面等,進(jìn)一步地構(gòu)成細(xì)胞膜、分泌泡、內(nèi)涵體等。高爾基體整合各種大分子進(jìn)行加工、分類(lèi)和包裝,然后分門(mén)別類(lèi)地送到細(xì)胞特定的部位或分泌到細(xì)胞外。高爾基體參與糖蛋白質(zhì)的糖基化、碳水化合物的合成、蛋白質(zhì)的分泌、膜轉(zhuǎn)化、溶酶體形成的細(xì)胞活動(dòng)。高爾基體的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的常用手段之一:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂組織細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得高爾基體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的高爾基體。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
報(bào)價(jià)單
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動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑是一種旨在通過(guò)機(jī)械或化學(xué)處理、差速和等密度離心方法,從動(dòng)物細(xì)胞中分離出活性完整而高度純化的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞器組分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,純度可達(dá)99%。適合于各種動(dòng)物原代和培養(yǎng)細(xì)胞(人體、老鼠、兔子等)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的制備。可以被用于細(xì)胞色素P450系統(tǒng)外源化合物(xenobiotics)代謝、脂類(lèi)代謝、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白和腔內(nèi)蛋白等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量高。技術(shù)背景內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmicreticulum;ER)是真核生物的細(xì)胞器組分,構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)小管(tubules)、囊泡(vesicles)和小池(cisternae/sac)相互連接的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),負(fù)責(zé)蛋白轉(zhuǎn)譯、折疊和轉(zhuǎn)運(yùn)成為細(xì)胞膜成分(例如跨膜受體和其它整合膜蛋白等)或分泌型蛋白(例如消化性酶),負(fù)責(zé)鈣離子區(qū)隔(sequestration),以及糖原、固醇類(lèi)和其它大分子的生產(chǎn)和儲(chǔ)存等功能。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分成三種:粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(Roughendoplasmicreticulum;RER)、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(Smoothendoplasmicreticulum;SER)和肌質(zhì)網(wǎng)(sarcoplasmicreticulum;SR)。根據(jù)細(xì)胞代謝的需要,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)會(huì)互相轉(zhuǎn)換。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通過(guò)核糖體合成蛋白質(zhì)并分類(lèi);滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行固醇、碳水化合物和藥物代謝等。肌質(zhì)網(wǎng)的主要功能為儲(chǔ)存和釋放鈣離子。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的常用手段之一:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂組織細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得內(nèi)質(zhì)網(wǎng);甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2016-03-17 00:00
應(yīng)用文章
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人體血小板高純分離試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 人體血小板高純分離試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2015-01-05 00:00
其它
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人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途人體血小板高純分離試劑是一種旨在通過(guò)等密度離心的方法,直接從人體全血樣品中分離出結(jié)構(gòu)完整而高度純化的血小板組分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于人體(生理或病理)血小板的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,純度可達(dá)99%。可以被用于凝集試驗(yàn)、功能檢測(cè)等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度保證。技術(shù)背景血小板(platelet),又稱(chēng)為凝血細(xì)胞(thrombocytes),是一種小而形狀規(guī)則的細(xì)胞片段,直徑2至3微米。其前體為巨核細(xì)胞(megakaryocytes),平均生命周期5至9天。血小板在止血過(guò)程(hemostasis)中起著重要作用,幫助形成血液凝塊,同時(shí)也是多種生長(zhǎng)因子,包括血小板源生長(zhǎng)因子(platelet-derivedgrowthfactor)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforminggrowthfactor-β;TGF-β)、堿性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basicfibroblastgrowthfactor;bFGF)等的自然來(lái)源。體內(nèi)血小板數(shù)量和功能異常會(huì)產(chǎn)生血小板病(thrombocytopathy):血小板過(guò)低(thrombocytopenia)或功能降低(thrombasthenia),將導(dǎo)致出血;過(guò)高(thrombocytosis)則容易產(chǎn)生血塊,而引起中風(fēng)、心肌梗塞、肺栓塞(embolism)。血小板的分離是現(xiàn)代血液學(xué)研究的Z常用的手段之一。福特(Ford)等使用等密度介質(zhì)(1.063克/毫升),通過(guò)低速離心,一步從紅細(xì)胞和白細(xì)胞中獲得純度更高、活性保證、結(jié)構(gòu)完整的血小板。產(chǎn)品內(nèi)容高純液(ReagentA)毫升稀釋液(ReagentB)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在4℃冰箱里;高純液(ReagentA),避免光照;嚴(yán)格無(wú)菌操作;有效保證6月用戶(hù)自備2毫升離心管:用于樣品操作的容器15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器4℃(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作實(shí)驗(yàn)步驟準(zhǔn)備1個(gè)無(wú)菌的15毫升錐形離心管搖勻試劑盒里的高純液(ReagentA)移出xx毫升高純液(ReagentA)到15毫升錐形離心管加入xx毫升稀釋液(ReagentB),混勻此為高純工作液[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人體xue xiao ban 高純分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 人體xuexiaoban高純分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途人體xuexiaoban高純分離試劑是一種旨在通過(guò)等密度離心的方法,直接從人體全xue樣品中分離出結(jié)構(gòu)完整而高度純化的xuexiaoban組分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于人體(生理或病理)xuexiaoban的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,純度可達(dá)99%。可以被用于凝集試驗(yàn)、功能檢測(cè)等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度保證。技術(shù)背景xuexiaoban(platelet),又稱(chēng)為凝xue細(xì)胞(thrombocytes),是一種小而形狀規(guī)則的細(xì)胞片段,直徑2至3微米。其前體為巨核細(xì)胞(megakaryocytes),平均生命周期5至9天。xuexiaoban在止xue過(guò)程(hemostasis)中起著重要作用,幫助形成xue液凝kuai,同時(shí)也是多種生長(zhǎng)因子,包括xuexiaoban源生長(zhǎng)因子(platelet-derivedgrowthfactor)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforminggrowthfactor-β;TGF-β)、堿性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basicfibroblastgrowthfactor;bFGF)等的自然來(lái)源。體內(nèi)xuexiaoban數(shù)量和功能異常會(huì)產(chǎn)生xuexiaoban病(thrombocytopathy):xuexiaoban過(guò)低(thrombocytopenia)或功能降低(thrombasthenia),將導(dǎo)致出xue;過(guò)高(thrombocytosis)則容易產(chǎn)生xuekuai,而引起中風(fēng)、心肌梗塞、肺栓塞(embolism)。xuexiaoban的分離是現(xiàn)代xue液學(xué)研究的Z常用的手段之一。福特(Ford)等使用等密度介質(zhì)(1.063克/毫升),通過(guò)低速離心,一步從紅細(xì)胞和白細(xì)胞中獲得純度更高、活性保證、結(jié)構(gòu)完整的xuexiaoban。產(chǎn)品內(nèi)容高純液(ReagentA)毫升稀釋液(ReagentB)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在4℃冰箱里;高純液(ReagentA),避免光照;嚴(yán)格無(wú)菌操作;有效保證6月用戶(hù)自備2毫升離心管:用于樣品操作的容器15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器4℃(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作實(shí)驗(yàn)步驟準(zhǔn)備1個(gè)無(wú)菌的15毫升錐形離心管搖勻試劑盒里的高純液(ReagentA)移出xx毫升高純液(ReagentA)到15毫升錐形離心管加入xx毫升稀釋液(ReagentB),混勻此為高純工作液小心沿著管壁,在高純工作液上面,一滴一滴加入5毫升新鮮抗凝全xue樣品室溫下,放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘,速度為350g(注意:避免使用快速制動(dòng))小心取出離心管:可見(jiàn)上端二分之一處黃色xue漿和下端四分之一處紅色xue細(xì)胞之間的混濁xuexiaoban樣品帶小心抽去xuexiaoban樣品帶以上的xue漿液體小心收集xuexiaoban樣品帶到2毫升離心管(注意:置于xue漿和xuexiaoban樣品帶交界處下緣小心緩慢抽吸)放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心20分鐘,速度為2000g小心抽去上清液(選擇步驟)加入xx至xx毫升稀釋液(ReagentB)(選擇步驟)放進(jìn)微型離心機(jī)離心20分鐘,速度為2000g(選擇步驟)小心抽去上清液加入xx微升稀釋液(ReagentB),混勻放進(jìn)-70℃冰箱里保存注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為10次(5毫升全xue/次)操作操作時(shí),避免污染母液,尤其是高純液(ReagentA)操作時(shí),須戴手套建議使用新鮮抗凝全xue全xue樣品采集建議使用EDTA二鉀xue液抗凝液(12059.1)或ACDxue液抗凝液(12059.4),建議使用足夠的樣品量xuexiaoban提取量因人而異;如果不足,建議增加全xue量8.本產(chǎn)品所獲得的線(xiàn)粒體純度(可達(dá)到99%)和產(chǎn)量Z為理想9.使用高純液(ReagentA)前,須搖勻后加入10.高純工作液Zdi使用量為5毫升。大于5毫升xue液樣品,與高純工作液1:1比例11.離心減速時(shí),不得使用制動(dòng)方式12.為了避免紅細(xì)胞和白細(xì)胞污染,抽吸xuexiaoban樣品帶時(shí),留出2至3毫米紅細(xì)胞與xuexiaoban交界處的液體(上圖藍(lán)色部分)每毫升全xue平均可獲得2X108xuexiaoban本公司提供系列xuexiaoban試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的xuexiaoban結(jié)構(gòu)完整本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的xuexiaoban維持正常活性本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線(xiàn)粒體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
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動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線(xiàn)粒體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線(xiàn)粒體分離試劑是一種旨在從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線(xiàn)粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動(dòng)物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線(xiàn)粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,可以被用于線(xiàn)粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱(chēng)同類(lèi)產(chǎn)品**。技術(shù)背景線(xiàn)粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線(xiàn)粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得線(xiàn)粒體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的線(xiàn)粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升凈化液(ReagentC)毫升強(qiáng)化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升活性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存凈化液(ReagentC)和活性液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶(hù)自備HANK平衡鹽緩沖溶液(12028)或PBS緩沖溶液(12033):用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液(12052):用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管:用于線(xiàn)粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管:用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管:用于保存線(xiàn)粒體4℃臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī):用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器:用于裂解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、動(dòng)物軟組織線(xiàn)粒體分離(組織勻漿法)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和4毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí))2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.即刻用刀片切碎組織5.放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管6.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7.渦旋震蕩5秒,充分混勻8.即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化組織(約80下)(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)8)9.將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管,10.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g11.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g13.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線(xiàn)粒體沉淀物14.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)15.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g16.(選擇步驟)小心抽去上清液17.加xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻18.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里二、動(dòng)物軟組織線(xiàn)粒體分離(化學(xué)處理法)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí))2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.移入一個(gè)液氮凍存管5.即刻放進(jìn)液氮罐過(guò)夜6.次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)碾碎組織(注意:切莫使組織凍融)7.放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管8.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9.渦旋震蕩5秒,充分混勻10.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)12.渦旋震蕩5秒,充分混勻13.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)9)14.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻15.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g16.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g18.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線(xiàn)粒體沉淀物19.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)20.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g21.(選擇步驟)小心抽去上清液22.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻23.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里三、動(dòng)物細(xì)胞線(xiàn)粒體分離(細(xì)胞勻漿法)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶(hù)自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面,3.小心抽去清洗液4.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次5.加入3毫升用戶(hù)自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)平面6.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7.手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落8.分別加入10毫升用戶(hù)自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9.全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管10.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g11.小心抽去上清液12.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞13.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g14.小心抽去上清液15.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16.渦旋震蕩5秒,充分混勻細(xì)胞顆粒群17.即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞(約80下)(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)8)18.將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g20.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g22.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線(xiàn)粒體沉淀物23.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)24.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g25.(選擇步驟)小心抽去上清液26.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻27.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里四、動(dòng)物細(xì)胞線(xiàn)粒體分離(化學(xué)處理法)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶(hù)自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面28.小心抽去清洗液3.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次4.加入3毫升用戶(hù)自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)平面5.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6.手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落7.分別加入10毫升用戶(hù)自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8.全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管9.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g10.小心抽去上清液11.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)12.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g13.小心抽去上清液14.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15.渦旋震蕩5秒,充分混勻16.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)18.渦旋震蕩5秒,充分混勻19.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)9)20.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻21.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g22.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g24.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線(xiàn)粒體沉淀物25.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)26.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g27.(選擇步驟)小心抽去上清液28.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻29.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為10次(1克動(dòng)物組織或5X107細(xì)胞)或50次(200毫克動(dòng)物組織或1X107細(xì)胞)操作2.實(shí)際操作的動(dòng)物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整:例如200毫克動(dòng)物組織:試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3.所有操作均須在4℃或以下?tīng)顟B(tài)進(jìn)行4.操作時(shí),須戴手套5.操作時(shí),須無(wú)菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)6.建議使用足夠的樣品量7.建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間8.通常勻化次數(shù)為80下達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類(lèi)型會(huì)存在差異。用戶(hù)可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)9.通常孵育5分鐘達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類(lèi)型會(huì)存在差異。用戶(hù)可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)10.對(duì)于難以裂解的細(xì)胞,例如HeLa細(xì)胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11.通常5X107細(xì)胞或1克動(dòng)物組織的線(xiàn)粒體含量為50微克以上線(xiàn)粒體蛋白12.如果需要計(jì)量線(xiàn)粒體,稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成,否則線(xiàn)粒體將分解13.本產(chǎn)品所獲得的線(xiàn)粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過(guò)調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線(xiàn)粒體純化程度,但線(xiàn)粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14.如果需要獲得99%以上純度的線(xiàn)粒體,使用動(dòng)物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線(xiàn)粒體分離試劑盒-10006.315.線(xiàn)粒體正常活性測(cè)定方法是:CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16.線(xiàn)粒體內(nèi)外膜完整測(cè)定方法是:CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17.本公司提供線(xiàn)粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線(xiàn)粒體溶解等18.本公司提供系列線(xiàn)粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長(zhǎng)期穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線(xiàn)粒體內(nèi)外膜完整3.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線(xiàn)粒體維持正常活性4.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2015-08-25 00:00
課件
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細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
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2014-12-31 00:00
應(yīng)用文章
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紅細(xì)胞可溶性膜蛋白(純提)制備試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2015-01-29 00:00
安裝說(shuō)明
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動(dòng)物硬組織活性線(xiàn)粒體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2015-05-19 00:00
操作手冊(cè)
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植物線(xiàn)粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 植物線(xiàn)粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-14 00:00
應(yīng)用文章
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動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2015-09-11 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2015-08-26 00:00
課件
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動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2014-12-19 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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高爾基體染色試劑盒說(shuō)明書(shū)PK401A PK401
- FDRapidGolgiStainKit(small)fdneurotech是世界的染色試劑盒供應(yīng)商,其提供的高爾基體染色試劑盒以其高品質(zhì)的結(jié)果于科研界,光2012年列出來(lái)的引用文獻(xiàn)就多達(dá)70篇,2011年更是100多篇,fdneurotech從2012年開(kāi)始就和上海起福生物科技公司簽訂長(zhǎng)期合作協(xié)議為ZG科研人員帶來(lái)**的產(chǎn)品,并在ZG設(shè)有庫(kù)存,歡迎廣大科研工作者和我們公司聯(lián)系上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司上海市浦東繡川路561號(hào)1102室4006551678傳真:021-50724961WWW.QFBIO.COMPK401AFDRapidGolgiStainKit125mlFDNEUROTECHNOLOGIES6200PK401FDRapidGolgiStainKit250mlFDNEURO9800Golgi-Coximpregnation1,2hasbeenoneofthemosteffectivetechniquesforstudyingboththenormalandabnormalmorphologyofneuronsaswellasglia.UsingtheGolgitechnique,subtlemorphologicalalterationsinneuronaldendritesanddendriticspineshavebeendiscoveredinthebrainsofanimalstreatedwithdrugsaswellasinthepostmortembrainsofpatientswithneurologicaldiseases3,4.However,theunreliabilityandthetime-consumingprocessofGolgistaininghavebeenmajorobstaclestothewidespreadapplicationofthistechniqueFDRapidGolgiStainKitisdesignedbasedontheprincipleofthemethodsdescribedbyRamón-Moliner2,GlaserandVanderLoos5.ThiskithasnotonlydramaticallyimprovedandsimplifiedtheGolgi-Coxtechniquebuthasalsoproventobeextremelyreliableandsensitivefordemonstratingmorphologicaldetailsofneuronsandglia,especiallydendriticspines.TheFDRapidGolgiStainKithasbeentestedextensivelyandwidelyusedonthebrainsfromseveralspeciesofanimalsaswellasonthespecimensofpostmortemhumanbrains.Kitcontents:StoreatroomtemperatureSolutionA125mlSolutionB125mlSolutionC125mlx2SolutionD125mlSolutionE125mlGlassSpecimenRetriever2Naturalhairpaintbrush3Droppingbottle1UserManual1Materialsrequiredbutnotincluded:Doubledistilledordeionizedwater.Plasticorglasstubesorvials.Histologicalsuppliesandequipment,includinggelatin-coatedmicroscopeslides,coverslips,stainingjars,ethanol,xyleneorxylenesubstitutes,resinousmountingmedium(e.g.Permount),andalightmicroscope.References:CorsiP.(1987)CamilloGolgi’smorphologicalapproachtoneuroanatomy.InMaslandRL,Portera-SanchezAandToffanoG(eds.),Neuroplasticity:anewtherapeutictoolintheCNSpathology,pp1-7.Berlin:Springer.Ramón-MolinerE.(1970)TheGolgi-Coxtechnique.InNautaWJHandEbbessonSOE(eds.),ContemporaryMethodsinNeuroanatomy.pp32-55,NewYork:Springer.GravelandGA,WilliamsRS,andDiFigliaM.(1985)EvidencefordegenerativeandregenerativechangesinneostriatalspinyneuronsinHuntington’sdisease.Science.227:770-3.RobinsonTE,andKolbB.(1997)Persistentstructuralmodificationinnucleusaccumbensandprefrontalcortexneuronsproducedbypreviousexperiencewithamphetamine.J.Neurosci.17:8491-7.GlaserME,andVanderLoosH.(1981)Analysisofthickbrainsectionsbyobverse-reversecomputermicroscopy:applicationofanew,highclarityGolgi-Nisslstain.J.Neurosci.Meth.4:117-25.[詳細(xì)]
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2018-09-29 10:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-02-04 00:00
其它
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動(dòng)物硬組織線(xiàn)粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 主要用途動(dòng)物硬組織線(xiàn)粒體粗提分離試劑是一種旨在從動(dòng)物硬組織中分離出完整而純化的線(xiàn)粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于各種動(dòng)物硬組織(心臟或肌肉)的線(xiàn)粒體的制備。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱(chēng)同類(lèi)產(chǎn)品**。技術(shù)背景線(xiàn)粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線(xiàn)粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得線(xiàn)粒體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的線(xiàn)粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升凈化液(ReagentC)毫升強(qiáng)化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升酶解液(ReagentF)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存凈化液(ReagentC)和酶解液(ReagentF)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保證12月用戶(hù)自備15毫升錐形離心管:用于線(xiàn)粒體初步制備操作的容器1.5毫升離心管:用于保存線(xiàn)粒體的容器4℃臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī):用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器:用于裂解細(xì)胞[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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