凈化：ProElut SCX 500 mg/3 mL (Cat.#63604)?

1、提取 10 g 與20 mL 0.1% 磷酸溶液，渦旋混合5 min，待凈化。

2、凈化 ProElut SCX 500 mg/3 mL (Cat.#63604)

a 活化： 將5 mL 甲醇、5 mL 水加入小柱，流出液棄去；

b 上樣： 將樣品加入小柱*，流出液棄去；

c 淋洗： 依次用5 mL 0.1% 磷酸溶液、5 mL 水淋洗，流出液棄去；

d 洗脫： 30 mL 0.2 mol/L 磷酸氫二鉀溶液（磷酸調節pH 8.0），洗脫，收集洗脫液，用磷酸調節pH 2，

待下一步凈化 ProElut C18 500 mg/6 mL (Cat.#63104)

a 活化： 將5 mL 甲醇、5 mL 水加入小柱（ProElut C18，500 mg/3 mL），流出液棄去

； b 上樣： 將樣品加入小柱*，流出液棄去

； c 淋洗： 5 mL 0.1% 磷酸溶液淋洗C18 柱，流出液棄去，抽干小柱，再用5 mL 甲基叔丁基醚+ 正己烷混合溶液（4+1）淋洗，流出液棄去；

d 洗脫： 10 mL 甲醇洗脫，收集洗脫液 e 重新溶解：35 oC 下將洗脫液減壓蒸餾至干，1 mL 流動相定容，微孔濾膜過濾后，HPLC 分析

注：由于樣品量超過柱容量，應分次上樣或在SPE 柱上安裝12 mL 儲液管 (Cat.#4810)，適配器 (Cat.#4803)

色譜柱：Diamonsil C18(2) 150 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99601)

流動相：緩沖溶液/ 乙腈

流速：1.0 mL/min

進樣量：20 μL

檢測器：熒光檢測器，激發波長：263 nm，發射波長：435 nm

適用于蜂蜜中鏈霉素的檢測。

1. 鏈霉素