上海富衡 | 小鼠乳腺癌細胞4T1細胞
小鼠乳腺癌細胞4T1是研究三陰性乳腺癌(TNBC)和轉移機制的核心工具,其源于BALB/c小鼠的自發性乳腺腫瘤,具有高度侵襲性和多器官轉移特性。作為人Ⅵ期乳腺癌的動物模型,4T1細胞在注射至小鼠體內后,可自發形成原發灶并向肺、肝、淋巴結、腦等遠端器官轉移,且無需摘除原發腫瘤即可觀察轉移進程。以下從生物學特性、研究應用及培養要點三方面解析其重要性。
一、生物學特性與模型優勢
4T1細胞呈貼壁生長,形態為上皮樣,推薦使用含10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培養基培養。其核心優勢包括:
高致瘤性與轉移性:相比其他乳腺癌模型(如EMT-6或4T07),4T1能形成可見的轉移灶,且轉移細胞團可少至單個細胞,通過抗6-硫鳥嘌呤特性實現高靈敏度檢測。
臨床相關性:其生長特性與人類三陰性乳腺癌高度相似,尤其適用于研究腫瘤微環境、免疫逃逸及轉移信號通路(如STAT3、MMP2/9)。
二、科研與轉化醫學應用
轉移機制解析:4T1模型揭示了上皮間質轉化(EM和Src通路在轉移中的作用。例如,抑制STAT3通路可減少癌細胞遷移和侵襲。
藥物篩選平臺:天然產物研究:迷迭香提取物合成的鐵納米顆粒(Rosemary-FeNPs)及生姜提取物均顯示出對4T1細胞的顯著細胞毒性。
納米藥物開發:紫杉醇固體脂質納米粒(DTX-loaded SLNs)能抑制4T1的肺轉移,療效優于傳統劑型。
免疫治療探索:通過敲除免疫相關基因(如TLR4),可研究腫瘤微環境對治療響應的影響,為免疫檢查點抑制劑提供實驗基礎。
三、培養要點與注意事項
4T1細胞憑借其高度轉移性和臨床相關性,成為乳腺癌研究的核心模型。從機制解析到藥物開發,其在基礎與轉化醫學中均展現不可替代的價值。隨著基因編輯技術(如CRISPR/Cas9)和活細胞成像的應用,4T1模型將繼續推動精準腫瘤治療的發展
傳代與消化:細胞需在80%匯合度時傳代,推薦1:6-1:8比例。消化時間較長(5-15分鐘),建議分步消化:首次消化后收集脫落細胞,剩余細胞二次消化以確保單細胞懸液。
污染與碎片控制:培養中常見黑點(細胞代謝產物或碎片),可通過PBS潤洗或低速離心清除。避免使用反復凍融的血清以減少蛋白沉淀。
凍存與復蘇:推薦使用含10% DMSO的無血清凍存液,程序降溫后存于液氮。復蘇時需快速融化并離心去除凍存液,以維持細胞活性。
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