上海富衡 | 3T3-L1細胞
小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞3T3-L1是研究脂肪代謝與相關疾病的經典細胞模型，其源于Swiss小白鼠胚胎成纖維細胞NIH-3T3的克隆亞株，具有穩定的傳代能力和定向分化為成熟脂肪細胞的特性。該細胞在基礎研究和藥物開發中占據重要地位，以下從特性、分化機制及應用領域三方面展開論述。
一、生物學特性
3T3-L1細胞呈貼壁生長，形態為成纖維細胞樣，推薦使用含10%小牛血清（CS）的DMEM培養基培養。需注意：胎牛血清（FBS）會加速細胞增殖并導致自發分化。其生長特性具有接觸抑制性，當細胞密度達到80%-90%時需及時傳代，避免過早分化。傳代比例建議1:3-1:4，胰酶消化時間控制在2-3分鐘，以維持細胞活力。
二、成脂分化機制
通過“雞尾酒誘導法”，3T3-L1可分化為成熟脂肪細胞。經典方案分四階段：
接觸抑制：細胞長滿后靜置2天，退出生長周期；
誘導階段：加入含IBMX（0.5mM）、地塞米松（1μM）和胰島素（1-10μg/mL）的培養基，激活PPARγ等轉錄因子，啟動脂滴合成信號通路。
分化維持：換用僅含胰島素的培養基促進脂質積累；
成熟階段：更換常規培養基，持續培養至脂滴大量形成（通常需8-10天），油紅O染色可見典型紅色脂滴。
研究顯示，聯合PPARγ激動劑（如羅格列酮）可顯著提升分化效率，脂滴生成量較單一誘導劑增加超300%。三、科研應用價值
四、注意事項
培養時需控制細胞密度（40-60%匯合度為宜），鋪板不均易導致分化差異。分化過程中換液需輕柔，避免脂滴脫落；凍存建議采用含10% DMSO的無血清凍存液，-80℃梯度降溫后轉入液氮。
3T3-L1細胞憑借其穩定的分化能力和廣泛的應用場景，已成為脂肪生物學研究的核心工具。隨著誘導方案的優化（如PPARγ激動劑聯用），其在新藥研發和代謝機制解析中的價值將進一步凸顯。
代謝疾病研究：作為肥胖、糖尿病等疾病的體外模型，用于解析脂質合成、胰島素抵抗等機制。例如，研究發現脂肪細胞外囊泡可通過調控β細胞存活參與糖尿病進程
藥物開發平臺：用于篩選降脂藥物或代謝調節劑，如噻唑烷二酮類藥物（TZDs）的效應驗證
跨物種研究：禽類研究中添加油酸可替代傳統誘導方案，拓展模型適用性。
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