經費告急!哪些耗材可以重復利用 | 上海富衡
當實驗室出現經費較為緊缺或暫時沒有耗材使用時,部分耗材經嚴格清洗、滅菌后也可重復使用作為暫時代替的應急手段,其主要適用于對成本敏感、非嚴格無菌要求或特定實驗場景(如原代細胞粗分離、初步培養),對于精度要求高的實驗,建議暫時擱置,避免數據上誤差和細胞、試劑的污染。
玻璃制品(最常用)
適用場景:常規細胞傳代、非原代細胞培養(如永生細胞系)。
處理步驟:
去殘渣:使用后立即倒棄培養基,用清水沖洗殘留細胞(避免干燥后難以清除)。
浸泡與刷洗:浸泡于中性洗滌劑(如專用玻璃清洗劑)或稀鹽酸(0.1M,去除蛋白殘留)中2-4小時,用軟毛刷輕柔刷洗內壁,避免刮傷表面。
徹底沖洗:用自來水沖洗5-10次,再用蒸餾水/去離子水沖洗3次,倒置瀝干。
滅菌:高壓蒸汽滅菌(121℃,20分鐘)或干熱滅菌(160℃,2小時),滅菌后干燥保存。
注意:
玻璃表面若有劃痕或破損,易殘留細胞或污染物,需淘汰。 - 原代細胞、干細胞等敏感細胞培養時,建議使用一次性TC處理耗材(玻璃表面親水性低于塑料,可能影響貼壁)。
優勢:耐高溫、化學穩定性強,適合反復滅菌。
處理要點:
使用后立即浸泡于清水中(避免液體干涸堵塞管口),用含洗滌劑的軟毛刷清洗內壁,必要時用超聲清洗機輔助去垢。
滅菌前需烘干或瀝干,可采用牛皮紙包裹后高壓滅菌,或放入金屬筒中干熱滅菌。
金屬器械
適用場景:組織塊處理(如原代細胞分離)、胚胎操作等。
處理步驟:
1、初步清潔:用75%酒精擦拭表面,去除組織碎屑。
2、深度滅菌:
高壓蒸汽滅菌(適合耐濕熱器械,如不銹鋼制品)。
干熱滅菌(180℃,1小時,適合精密器械)或灼燒滅菌(火焰快速灼燒,僅用于局部處理,需注意避免器械變形)。
注意:
避免使用生銹或鍍層脫落的器械,防止金屬離子污染細胞。
精密器械(如顯微鑷)建議單獨包裝滅菌,避免碰撞損傷。
用途:組織消化后過篩制備單細胞懸液。
處理方法:
用PBS沖洗殘留組織,浸泡于0.1% SDS溶液中30分鐘,清水沖洗后超聲處理(去除蛋白殘留)。
高壓滅菌后晾干,存放于干燥盒中。
塑料耗材(有限重復使用)
可重復的類型:
離心管(50mL/15mL,無TC處理的普通型):用于細胞離心、試劑分裝,非貼壁操作。
試劑槽、移液槽:用于配置培養基或緩沖液,需確保無細胞黏附殘留。 禁止重復使用:TC處理的貼壁培養板/瓶(表面涂層易磨損,影響細胞黏附)、低吸附耗材(涂層破壞后失去防黏功能)。
塑料耗材重復滅菌次數有限(通常3次以內),高溫高壓后易變形、老化,釋放化學物質(如增塑劑),可能干擾細胞狀態。
處理:用后立即清洗表面細胞殘渣,75%酒精浸泡30分鐘,或高壓滅菌(注意硅膠耐溫上限,避免過度高溫)。
適用:僅用于非敏感細胞的傳代(如HeLa細胞),避免用于原代細胞或基因編輯細胞。
其他可重復耗材
用途:特殊培養體系(如氣液界面培養、共培養支架)。
處理:鹽酸浸泡去除金屬氧化層,清水沖洗后高壓滅菌,干燥保存。
2、玻璃注射器(帶金屬針頭)
適用:細胞注射、微滴操作等,需確保針頭無堵塞,玻璃活塞潤滑良好。
滅菌:拆卸后分別清洗,高壓滅菌或干熱滅菌。
不可重復使用的耗材(必須一次性)
類型 | 原因 |
TC 處理培養板 / 瓶 | 表面親水性涂層易被洗滌劑破壞,重復使用導致細胞貼壁異常。 |
移液器吸頭(普通 / 濾芯) | 塑料材質易殘留核酸、蛋白或化學試劑,且滅菌后可能變形,影響移液精度。 |
細胞培養皿(帶透氣膜) | 透氣膜結構復雜,清洗后無法保證無菌性和透氣性。 |
凍存管 | 內壁可能有防黏涂層,且凍存過程中可能殘留細胞保護劑(如 DMSO),難以徹底清除。 |
重復使用的核心原則
避免用于關鍵實驗:原代細胞培養、基因編輯細胞、干細胞分化等對污染高度敏感的場景,必須使用一次性耗材。
標記重復次數:在耗材上標注“已使用X次”,塑料耗材建議3次以內,玻璃制品5次以內(視磨損情況)。
無殘留檢測:清洗后用蛋白檢測試劑(如BCA法)驗證表面無蛋白殘留,或通過空白培養(接種培養基后孵育24小時,觀察是否渾濁)排查污染。
滅菌記錄:建立耗材滅菌臺賬,記錄每次滅菌時間、條件和使用人。
重復使用可降低成本(尤其大規模培養),但需投入額外的清洗、滅菌時間和人力,需評估綜合效益。
可重復使用的耗材以玻璃制品和金屬器械為主,塑料耗材僅在非貼壁、低敏感場景有限重復。以上重復耗材或多或少會對細胞、實驗產生一些誤差或者污染,僅為經費非常緊缺的實驗室或短期內無法提供相應耗材的應急手段,對于科研精度要求高的實驗,優先使用一次性耗材以避免污染風險和數據偏差。
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