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上海富衡 | 導致細胞完全培養基看起來有些混濁的原因

來源:上海富衡生物科技有限公司      分類:操作使用 2025-03-24 13:45:12 90閱讀次數
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細胞完全培養基出現混濁可能由多種原因引起,以下是常見原因及對應的分析和建議:


01

微生物污染



細菌或真菌污染:這是最常見的混濁原因。細菌污染時培養基會明顯渾濁,可能伴隨異味;真菌污染則可能出現絲狀、絮狀懸浮物。

支原體污染:支原體污染通常不會立即導致明顯混濁,但長期培養后培養基可能變渾濁或顏色異常(如pH值變化)。


解決建議

  • 立即顯微鏡觀察是否有微生物(如細菌的桿狀、球狀形態,真菌的菌絲)。

  • 取少量培養基接種到瓊脂平板或肉湯中培養,確認是否有污染。

  • 污染的培養基需徹底丟棄,相關實驗器材滅菌,避免交叉污染。


02

細胞死亡或碎片




(該圖來源網絡)

細胞過度生長或死亡:當細胞密度過高、營養耗盡或受到毒性物質影響時,大量細胞死亡并釋放內容物(如DNA、蛋白質),導致培養基混濁。

細胞碎片積累:傳代時消化過度或細胞刮擦損傷可能產生碎片,懸浮在培養基中形成混濁。


解決建議
  • 檢查細胞狀態,觀察是否有大量漂浮死細胞或貼壁細胞異常皺縮。

  • 及時傳代,避免細胞密度過高。

  • 優化消化條件,減少細胞損傷。


03

培養基成分沉淀




血清或蛋白析出:血清中的脂蛋白、纖維蛋白原等成分在低溫儲存或反復凍融后可能析出,形成絮狀或顆粒狀沉淀。

鹽類或試劑結晶:培養基中的某些鹽類(如碳酸氫鈉)在pH值變化或溫度過低時可能析出,導致混濁。


解決建議
  • 輕輕搖勻培養基,觀察沉淀是否溶解。

  • 若沉淀由血清引起,可將培養基在37℃水浴中溫和加熱并輕輕晃動,促進溶解。

  • 避免培養基長時間暴露在低溫環境中,配制時確保成分充分溶解。


04

操作不當或試劑問題




配制過程未混勻:培養基中添加的血清、抗生素等試劑未充分混勻,可能導致局部混濁。

試劑變質:過期的血清、緩沖液或添加劑可能因成分降解而產生混濁。


解決建議

  • 配制培養基時充分混勻,確保所有成分溶解。

  • 檢查試劑保質期,避免使用過期或儲存不當的試劑。



總結排查步驟




  1. 首先通過顯微鏡觀察是否存在微生物污染。

  2. 檢查細胞狀態,判斷是否因細胞死亡或碎片導致混濁。

  3. 觀察沉淀形態,嘗試加熱或搖勻是否能改善混濁。

  4. 回顧操作步驟,確認試劑使用和配制過程是否規范。 根據具體原因采取相應措施,如更換新鮮培養基、調整培養條件或排查污染源,以確保細胞培養的健康和實驗結果的可靠性。







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